關(guān)于如何鑒定收到的新細胞是否有污染

一、肉眼觀(guān)察以下幾項：
1. 細胞瓶身：
如果瓶身上沒(méi)有裂縫，正常；如果瓶身上有裂縫，則污染幾率非常大。
2. 培養基顏色：
如果培養基顏色是紅色或者粉色，正常；如果是橙色，則可能是污染或者細胞過(guò)密；如果是黃色，則污染幾率非常大。
3. 培養基澄清度：
如果培養基澄清，正常；如果有少許漂浮物，則可能是污染或者有細胞凋亡；如果培養基很渾濁，甚至出現絮狀物，則污染幾率非常大。


 

二、進(jìn)行顯微鏡下觀(guān)察（通常觀(guān)察前需先靜置細胞1-2h）
顯微鏡下可以清晰觀(guān)察到細胞是否有菌類(lèi)污染，菌類(lèi)污染通常分為桿菌、球菌和霉菌，為了方便大家分辨，我特地找了之前收到有典型污染的細胞照片，希望能幫助大家判斷。
1. 桿菌

常見(jiàn)的有大腸桿菌，長(cháng)度通常在2-5um左右。

2. 球菌

常見(jiàn)的有葡萄球菌，直徑通常在1-2um左右。

3. 霉菌

常見(jiàn)的有毛霉，菌絲寬2-10um左右，長(cháng)度短則幾十um，長(cháng)則可達幾mm。

       需要提醒的是，因為運輸過(guò)程中細胞離開(kāi)了其正常生長(cháng)所需要的環(huán)境，部分細胞會(huì )出現凋亡或產(chǎn)生細胞碎片，容易誤認為是細菌污染；另外培養基中的雜質(zhì)纖維也容易誤認為是霉菌污染，具體區分方法如下：

1.細胞碎片和桿菌
細胞碎片只會(huì )隨著(zhù)細胞狀態(tài)的變差而變多，通常增長(cháng)不快；桿菌則增殖非?？?，以常見(jiàn)的大腸桿菌為例，常溫25℃增殖1倍需要40min左右（此數據可查閱相關(guān)文獻驗證），培養基很快變黃且渾濁。

2.凋亡細胞和球菌
凋亡細胞通常只比正常細胞小一點(diǎn)，只會(huì )隨著(zhù)細胞狀態(tài)的變差而變多，通常增長(cháng)不快；球菌則要小很多，且成串或成團，培養基很快變黃且渾濁。
3.雜質(zhì)纖維和霉菌
雜質(zhì)纖維通常是過(guò)濾時(shí)殘留的濾紙纖維，或者是酒精棉球上的棉纖維，在不開(kāi)瓶處理的情況下其數量不會(huì )增長(cháng)；霉菌的話(huà)雖然增殖速度沒(méi)有桿菌和球菌快，但還是會(huì )有明顯增殖。